PCR, na polymerase chain reaction, dia teknika ampiasaina hanamafisana ny filaharan'ny ADN.Izy io dia novolavolain'i Kary Mullis voalohany tamin'ny taona 1980, izay nahazo ny loka Nobel momba ny simia tamin'ny taona 1993 noho ny asany.Ny PCR dia nanova ny biolojia molekiola, ahafahan'ny mpikaroka manamafy ny ADN avy amin'ny santionany kely ary mandalina izany amin'ny antsipiriany.
PCR dia dingana telo izay atao amin'ny cycler mafana, milina afaka manova haingana ny hafanan'ny fifangaroana fanehoan-kevitra.Ny dingana telo dia ny denaturation, annealing ary ny fanitarana.
Amin'ny dingana voalohany, denaturation, ny ADN misy tady roa dia hafanaina amin'ny hafanana ambony (matetika manodidina ny 95°C) mba hanapaka ny fatorana hidrôzenina izay mitazona ireo kofehy roa.Izany dia miteraka molekiola ADN roa tady tokana.
Ao amin'ny dingana faharoa, annealing, ny mari-pana dia nampidinina ho eo amin'ny 55 ° C mba hamela ny primers anneal amin'ny filaharana mifameno amin'ny ADN tokana.Ny voalohany dia ampahany fohy amin'ny ADN izay natao hifanaraka amin'ny fizotry ny fahalianana amin'ny ADN kendrena.
Ao amin'ny dingana fahatelo, fanitarana, ny mari-pana dia niakatra ho any amin'ny manodidina ny 72 ° C mba hamela ny Taq polymerase (karazana ADN polymerase) synthesize tady ADN vaovao avy amin'ny primers.Ny Taq polymerase dia avy amin'ny bakteria miaina ao anaty loharano mafana ary mahazaka ny hafanana avo ampiasaina amin'ny PCR.
Aorian'ny tsingerin'ny PCR iray, ny vokatra dia dika roa amin'ny filaharan'ny ADN kendrena.Amin'ny famerimberenana ireo dingana telo ho an'ny tsingerina maromaro (matetika 30-40), dia azo ampitomboina tsikelikely ny isan'ny dika mitovy amin'ny filaharan'ny ADN.Midika izany fa na dia kely aza ny ADN fanombohana dia azo ampitomboina mba hamokarana kopia an-tapitrisany na an'arivony tapitrisa mihitsy aza.
Ny PCR dia manana fampiharana maro amin'ny fikarohana sy diagnostika.Ampiasaina amin'ny génétique izy io mba handinihana ny asan'ny fototarazo sy ny fiovan'ny toetr'andro, amin'ny forensika hamakafaka ny porofo ADN, amin'ny fitiliana areti-mifindra mba hamantarana ny fisian'ny otrikaretina, ary amin'ny diagnostika prenatal mba hijerena ny aretina ara-pananahana amin'ny foetus.
Ny PCR ihany koa dia namboarina hampiasaina amin'ny karazany maro, toy ny PCR quantitative (qPCR), izay mamela ny habetsaky ny ADN ho refesina sy ny PCR (RT-PCR), izay azo ampiasaina hanamafisana ny filaharan'ny ARN.
Na dia eo aza ny fampiharana maro, ny PCR dia manana fetra.Mitaky fahalalana momba ny filaharan'ny kendrena sy ny fandrafetana ny primer mifanaraka amin'izany, ary mety ho mora diso izany raha toa ka tsy optimized araka ny tokony ho izy ny fepetran'ny fanehoan-kevitra.Na izany aza, miaraka amin'ny famolavolana sy fanatanterahana andrana tsara, ny PCR dia mijanona ho iray amin'ireo fitaovana matanjaka indrindra amin'ny biolojia molekiola.
Fotoana fandefasana: Feb-22-2023